Полимеразная цепная реакция (пцр) диагностика: что это такое

Содержание:

Посоветуйте нашим читателям, как проводить оценку рисков: силами своей организации или отдать предпочтение внешним экспертам?

Работодатель не обязан выстраивать процедуру оценки профессиональных рисков так, как он проводил специальную оценку условий труда. Чтобы провести спецоценку условий труда, необходимо обратиться в аккредитованную организацию, которая соответствует определенным требованиям закона.

Экспресс-курс в Контур.Школе

Оценка профессиональных рисков
Подробнее

Как показывает практика, провести полноценную оценку профессиональных рисков силами штатного специалиста по охране труда сложно. Работодателю необходимо сформировать комиссию или оценочную команду из специалистов по охране труда, пожарной безопасности, промышленной безопасности, специалистов по отдельным технологическим процессам, а также специалистов, которые знакомы с методологией оценки рисков.

Я бы рекомендовал привлекать внешних экспертов или направлять членов внутренней комиссии на обучение, которое поможет им четко понимать, что такое управление и оценка профессиональных рисками и как ее грамотно провести.

Сколько делается анализ ПЦР на коронавирус?

Время на заключение лабораторного анализа зависит от методики. Экспресс-результат можно получить за 45 минут. Делают такие тесты при помощи мобильного оборудования. На результаты стандартной диагностики нужно 1-3 дня. Но этот более длительный вариант считается достовернее.

Сделать быстрый экспресс-тест на COVID или диагностировать его стандартным методом можно в нашей клинике OMED. Здесь вы можете получить результат анализа ПЦР на коронавирус за сутки.

Мы используем только современное оборудование и гарантируем вам достоверный результат насколько это возможно на данный момент. Сколько ждать анализ ПЦР на коронавирус будет зависеть от выбранной вами методики. Цена также зависит от формата тестирования, но у нас такая диагностика доступна практически для каждого.

В какие этапы осуществляется проведение оценки профессиональных рисков?

Согласитесь, даже самая сложная процедура становится не такой страшной, если её выполнение «разложить по полочкам». То же самое и с проведением оценки профессиональных рисков. Всего можно выделить 6 этапов реализации этой процедуры. Да, говоря процедурамы подразумеваем процедуру управления профессиональными рисками. В этой статье мы будем подразумевать, что она уже у Вас разработана вместе с системой управления охраной труда (СУОТ). Итак, какие же это этапы?

  • Подготовка. На этом этапе создаётся комиссия по оценке профессиональных рисков, выбирается методика оценки, рассчитывается количество рабочих мест, подлежащих оценке. Если документы ещё не разработаны, то потребуются 3 процедуры СУОТ: по управлению профессиональными рисками, информирования работников по условию труда и реагирования на аварии и несчастные случаи.
  • Идентификация. На первом этапе комиссия начинает свою работу: из всевозможных опасностей нужно оставить те, которые релевантны для выбранного рабочего места. Иначе говоря, задача комиссии на этом этапе — идентифицировать профессиональные риски.
  • Оценка. Далее комиссия просматривает рабочие места, на которых осуществляется проведение оценки профессиональных рисков, оценивая опасности согласно выбранной методике.

Узнайте, как правильно проводить оценку профессиональных рисков

  • Поведенческие аудиты. Помимо наблюдений проводятся поведенческие аудиты безопасности труда (ПАБТ), которые помогают учесть в оценке профессиональных рисков самый главный поведенческий фактор — человеческий.
  • Расчёты и отчётность. После сбора информации комиссия отправляется её обрабатывать. Использование математических вычислений позволяет однозначно рассчитать степень риска по каждому рабочему месту и интерпретировать полученные показатели. Все полученные результаты фиксируются в отчёте и картах профессионального риска.
  • Работа с результатом. Результаты проведения оценки профессиональных рисков нужно довести до сведения работников, а комиссии — разработать план мероприятий по снижению степени риска (и дополнить им отчёт).

Значение ПЦР в диагностической практике

На данный момент метод ПЦР имеет важное значение как в науке, так и в прикладных сферах. С помощью этого метода был совершен прорыв в выявлении большого количества заболеваний, что позволило значительно поднять уровень медицинской диагностики

Основные сферы применения ПЦР:

  • уточнение вида инфекционного агента;
  • выявление острых и хронических инфекционных заболеваний различной локализации;
  • контроль эффективности проведенной терапии.

ПЦР-диагностика позволяет обнаружить бактерии (среди которых инфекция хеликобактер пилори), вирусы (например, гепатит С), грибки и простейшие. В настоящее время ПЦР является распространенным и часто незаменимым методом, используемым в медицинских и биологических исследовательских лабораториях. Отличные результаты ПЦР на ИППП (инфекции, передаваемые половым путем) сделали его ведущим методом для постановки окончательного диагноза при данных заболеваниях. Популярными комплексными исследованиями на основе метода ПЦР являются анализы на 6, 12 и 15 инфекций.

Обязательно ли сертифицировать СУОТ для малых предприятий?

Сертификация СУОТ подразумевает определение соответствия системы управления охраной труда международному стандарту OHSAS 18001. Данный вид сертификации является добровольным и приносит ощутимое конкурентное преимущество в тендерной борьбе, привлечении клиентов и партнёров. Со стороны трудового законодательства требований к сертификации СУОТ нет, а процедура остаётся добровольной, так что степень её необходимости определяется в каждом случае индивидуально.

Подведём итог. Теперь Вы знаете, чем отличается СУОТ для малых предприятий и готовы взяться предметно за работу. Начните свою разработку с Положения о системе управления охраной труда, оставьте в нём только самое необходимое. А если у Вас возникнут какие либо вопросы, помните: мы всегда рядом, на расстоянии одного телефонного звонка.

Специфичность и применение

ПЦР, как метод молекулярной диагностики, хорошо зарекомендовал себя, проверен временем и тщательно апробирован. Метод ПЦР, в частности, позволяет определить наличие патогена даже в случае, если в пробе присутствует всего несколько молекул нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК) диагностируемого возбудителя болезни. ПЦР позволяет выявлять и точно идентифицировать наличие патогенов, включая конкретные штаммы, не прибегая к трудоёмким и, порой, дорогостоящим микробиологическим методам и растениям-индикаторам, что сегодня особенно актуально. Чувствительность и специфичность метода значительно превосходит таковую у иммунохимических и микробиологических методов, а его ключевые принципы позволяют диагностировать наличие инфекций независимо от антигенной изменчивости патогенов.

Сегодня свой выбор в пользу диагностики методом ПЦР-анализа делают в первую очередь на основе того, что данный подход позволяет обнаруживать наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных инфекциях.

Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и специально подобранными высокоспецифичными праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 нуклеотидов. Каждый из подбираемых праймеров комплементарен одной из цепей двуцепочечной матрицы, фланкируя с 3’- и 5’-концов амплифицируемый фрагмент ДНК. В зависимости от того какие участки были выбраны для амплификпции (консервативные или вариабельные), можно идентифицировать патоген, как в пределах определенного вида или семейства, так и с точностью до конкретного штамма. Именно от правильности анализа последовательности нуклеотидов целевой ДНК или РНК и сделанного на его основе подбора праймеров зависит специфичность конкретной тест-системы.

В ходе ПЦР на первом этапе под действием высокой температуры (~94°С) происходит денатурация ДНК — разделение антипаралельных цепей двойной спирали. На втором этапе температуру понижают до уровня, при котором праймеры могут комплементарно взаимодействовать с участками геномной ДНК или кДНК (этап отжига праймеров). Если на этом этапе установить слишком низкую температуру, то праймеры будут отжигаться не только на строго специфичных местах и в результате мы получим множество неспецифических фрагментов разного размера. Если же температуру слишком завысить, то праймеры будут «сваливаться» со своего «родного» сайта связывания, в результате чего мы или вообще не получим продукта, или чувствительность тест-системы будет существенно снижена. Поэтому оптимизация температуры отжига в каждом конкретном случае очень важна. На третьем этапе, следующем после отжига праймеров, устанавливают температуру на уровне 64-72°С (значение конкретной температуры оптимизируется) — этот диапазон температур оптимален для используемых в ПЦР термостабильных ДНК-полимераз. На этом этапе и происходит достройка новой цепи ДНК, начиная с праймера (элонгация цепи). Точно воспроизводящийся программируемый цикл денатурация-отжиг-элонгация обеспечивается в специальных приборах — амплификаторах, повторяется 25-45 раз. Поскольку при каждом цикле количество фрагментов ДНК удваивается, то за 35 циклов от одной молекулы ДНК образуется около 1010, что и определяет высокую чувствительность метода, позволяющего достоверно определять присутствие всего 10-100 молекул целевой ДНК в анализируемом материале.

Методы лабораторной диагностики урогенитальных инфекций

Выявить имеющуюся мочеполовую инфекцию можно несколькими распространенными способами. К таковым относятся:

Бактериологический посев — один из самых простых и доступных анализов (не применяется для диагностики вирусных инфекций). Исследуемый биоматериал: слюна, кровь, моча, кал, сперма, мазок. За трое суток до анализа необходимо избегать сексуальных контактов.

Утром перед сдачей анализа рекомендуется воздержаться от мочеиспускания и гигиены половых органов (за ночь бактерии успевают скопиться во влагалище у женщин или в простате у мужчин).

Микроскопический анализ (мазок на флору) — еще один из высокоинформативных методов лабораторной диагностики инфекций. Исследуемый биоматериал: мазок из уретры или влагалища.

В ходе анализа с помощью микроскопа можно увидеть возбудителя инфекции и провести его видовую идентификацию. Метод позволяет выявить некоторые половые (гонорея, трихомониаз) и неспецифические инфекции. Иногда к обычной микроскопии добавляется подсветка (реакция иммунофлюоресценции). Подготовка к исследованию аналогичная.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — в сравнении с бакпосевом, более точное исследование, поскольку посредством его возможно выявление инфекционного агента даже в инкубационном периоде. Исследуемый материал: кровь из вены. Анализ сдается натощак, за несколько дней до него следует отказаться от приема фармпрепаратов (обсуждается с врачом).

ПЦР (полимеразно-цепная реакция) — на сегодня наиболее быстрый и точный метод выявления инфекций, позволяющий извлечь из сданного биологического материала ДНК микроба и идентифицировать его. ПЦР подходит для выявления практически всех возбудителей урогенитальной инфекции, погрешность данной методики составляет не более 5%. Исследуемый материал: кровь, моча или кал. Подготовка к анализу: та же.

Диагностика урогенитальных инфекций в «МедикСити»

  • Комплексное исследование ИППП (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis), количественное определение ДНК;
  • Урогенитальные инфекции у мужчин (N.gonorrhoeae / C.trachomatis / M.genitalium / T.vaginalis // U.parvum/urealyticum/M.hominis // C.albicans/glabrata/crusei), количественное определение ДНК;
  • Урогенитальные инфекции у женщин (N.gonorrhoeae / C.trachomatis / M.genitalium / T.vaginalis // U.parvum/urealyticum/M.hominis // C.albicans/glabrata/crusei // Бактериальный вагиноз), количественное определение ДНК;
  • Комплексное исследование ИППП (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis), качественное определение рибосомальной РНК методом NASBA.

Когда делать ПЦР на ковид лучше всего

Чтобы с самой большой вероятностью получить достоверный результат теста, его рекомендуется делать на восьмой день после предполагаемой даты заражения. А если у вас уже проявились симптомы, тест можно сделать сразу же, но самый точный результат вы получите только на третий день после ухудшения самочувствия.

Такая тенденция обусловлена тем, что именно в эти дни концентрация вируса самая высокая. Он уже успел распространиться по слизистым оболочкам, а иммунная система еще не начала с ним бороться. В связи с этим вероятность получения ложноотрицательного результата самая низкая. А через 1-2 недели после этого обнаружить вирус методом ПЦР тестирования становится достаточно сложно.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Кривая амплификацииКривая амплификации показывает зависимость флуоресценции репортерного красителя от номера цикла. Реакции различаются по времени, когда возможно обнаружить продукты амплификации. Чем больше изначальное количество ДНК-матриц в исследуемом образце, тем раньше возникнет достаточная для детекции флуоресценция.

Базовая линияВо время начальных циклов реакции наблюдаются фоновые флуоресцентные сигналы. В соответствие с этим фоном необходимо настроить значение базовой линии.

Дельта RnЗначение ΔRn представляет собой разницу значений Rn и базовой линии.

Референтный красительКраситель, который создает внутреннюю референтную флуоресценцию, по отношению к которой можно нормализировать репортерную флуоресценцию. Нормализация необходима для того, чтобы скорректировать флуктуации, связанные с различиями концентраций компонентов реакционной смеси, объема и особенностей образца.

Эффективность ПЦРСледующая формула описываю прохождение ПЦР:Cn=Ci*(1+E)n , гдеCi – начальное количество ДНК-матрицы,Cn – количество ампликонов на цикле n,n – количество циклов,E – эффективность данной реакции.Если эффективность максимальная (=1), тогда формула приобретет вид Cn=Ci*2n, при этом количество продуктов реакции (ампликонов) будет увеличиваться в 2 раза с каждым циклом. Если эффективность ниже, то каждый цикл ампликоны будут синтезироваться в меньшем количестве, что отобразиться на кривой амплификации. Оптимальная эффективность – от 90 до 110%.

Репортерный красительРепортерный краситель связан с 5’-концом зонда TaqMan. При гибридизации зонда с ДНК-матрицей, этот краситель дает флуоресцентный сигнал, сигнализирующий об успешной гибридизации. Если используется краситель SYBR Green , то сигнал последует при интеркалляции красителя в двухцепочечеую ДНК, что свидетельствует об успешной амплификации. Специфичность связывания с целевой последовательностью ДНК необходимо проверить по кривой плавления продуктов реакции, либо на гель-электрофорезе.

RnЗначение Rn представляет собой отношение интенсивности флуоресценции репортерного красителя к интенсивности флуоресценции референтного красителя.

Пороговое значение (пороговая линия, порог чувствительности)Это значение ΔRn для CT в данном виде анализа. Порог чувствительности настраивается таким образом, чтобы он был выше базовой линии, но при этом кривая амплификации должна пересекать его в самом начале экспоненциальной фазы.

Пороговый цикл (CT)Цикл, во время которого кривая амплификации пересекает пороговое значение.

Рекомендации по подготовке к анализу

Чтобы результаты были достоверными при проведении исследования ПЦР, сдать анализ нужно, соблюдая рекомендации по предварительной подготовке к диагностике:

  1. Перед сдачей слюны следует воздержаться от приема пищи и лекарств за 4 часа до забора материала. Непосредственно перед процедурой прополощите рот кипяченой водой.
  2. Вышеуказанными правилами нужно руководствоваться и при взятии образца с внутренней поверхности щеки. После полоскания рекомендуют провести легкий массаж кожи для выделения секрета железы.
  3. Мочу обычно собирают в домашних условиях. Для этого нужно провести тщательный туалет половых органов. В стерильный пластиковый контейнер необходимо собрать 50-60 мл мочи. Для обеспечения чистоты материала рекомендуется женщинам вставить тампон во влагалище, а мужчинам максимально оттянуть кожную складку. Нельзя сдавать материал в период менструальных выделений.
  4. Для сдачи спермы нужно воздержаться от полового акта в течение 3 дней до забора материала. Также врачи советуют отказаться от посещения сауны и принятия горячей ванны, употребления алкоголя и острой пищи. За 3 часа до анализа нужно воздержаться от мочеиспускания.
  5. Для сдачи урогенитального мазка, например если проводится анализ на хламидии ПЦР, как женщинам, так и мужчинам рекомендуется половой покой в течение 3 дней. За 2 недели до анализа нельзя принимать антибактериальные препараты. За неделю нужно прекратить использование интимных гелей, мазей, влагалищных свечей, спринцевание. За 3 часа до исследования нужно воздержаться от мочеиспускания. Во время менструаций забор материала не проводится, лишь спустя 3 дня после прекращения кровяных выделений можно взять урогенитальный мазок.

Что такое амплификация ДНК?

Для того, чтобы осуществить амплификацию ДНК, используются ДНК-матрицы, представляющие собой молекулы ДНК инфекций, использующиеся с целью клонирования ДНК. В основе самой амплификации лежит присущий всем живым организмам процесс достраивания ДНК при помощи удвоения его единичной цепочки.

Именно поэтому, взяв единичный фрагмент ДНК, специалист, выявляющий заболевание методом полимеразной цепной реакции, способен скопировать его и увеличить до требуемого числа копий в режиме цепной реакции. Так, например, первый цикл копирования образует 2 фрагмента, второй – 4, а третий уже, соответственно, 8.

Причем цикл длится считанные минуты и позволяет изменить температуру в микроскопическом химическом реакторе, содержащем все требуемые для воссоздания компоненты. В ходе присоединения искусственно созданных участков ДНК, ничем не отличающихся от ДНК вирусов и бактерий, создаются две короткие спирали, позволяющие воспроизвести будущую ДНК и включающие в свой состав 2 цепи участков ДНК.

В процессе амплификации применяется специфический участок ДНК-полимеразы и давший название тесту ПЦР, о котором идет речь в данной статье. Полимераза выступает в качестве катализатора реакции и обеспечивает прикрепление нуклеотидных оснований к увеличивающейся цепи ДНК, носящее последовательный характер. Это означает, что процесс амплификации ДНК является неоднократным возрастанием числа копий ДНК, присущих тому или иному микроорганизму.

Именно поэтому необходимость достраивания всей цепи ДНК для того, чтобы выявить возбудителя, отсутствует. Необходим лишь участок, присущий тому или иному микроорганизму. Производится анализ ПЦР на скрытые инфекции на специально программируемом оборудовании, а именно на амплификаторе или на ПЦР-термостате. Причем в зависимости от разновидности выявляемой инфекции данный процесс занимает не более 2-3 часов.

Чувствительность

Любая из современных систем ПЦР в реальном времени достигла такого уровня чувствительности, что стало возможно детектировать единичную копию ДНК-матрицы в образце. Чувствительность не зависит от абсолютного значения CT.

Как было сказано ранее, ключевым фактором для расчета чувствительности метода является эффективность реакции (рисунок 5). Другим важным моментом, связанным с детекцией малого количества копий ДНК является то, что распределение ДНК-матрицы будет отличаться от нормального. Вместо этого, оно будет стремиться к распределению Пуассона: то есть, если мы имеем большую выборку повторений, в каждом из которых, в среднем, по одной копии ДНК-матрицы, то, согласно распределению, в 37% образцов не будет ни одной копии, 37% будут иметь одну копию, а 18%  – по две копии ДНК-матрицы (см. рисунок 9). Следовательно, для того, чтобы обеспечить достаточную достоверность детекции малого количества ДНК, необходимо проводить достаточное количество повторений, для того, чтобы обойти ограничения, связанные с распределением Пуассона.

Рисунок 9. Распределение Пуассона для малого количества копий ДНК-матрицы. Синяя кривая показывает распределение Пуассона для 3,3 пг ДНК (1 копия молекулы ДНК). Фиолетовая – распределение Пуассона для 6,6 пг ДНК (1 клетка, 2 копии молекулы ДНК).

Как подготовиться к тесту ПЦР на коронавирус из ротоглотки?

Подготовка к сдаче анализа ПЦР на коронавирус подразумевает соблюдение ряда рекомендаций за три часа до сдачи биоматериала. Перед сдачей ПЦР на коронавирус нельзя делать следующее:

  • есть, пить и жевать жевательную резинку;
  • полоскать рот и горло;
  • использовать спреи и другие лекарственные препараты местного применения;
  • чистить зубы и курить;
  • использовать помаду или другую косметику для губ.

И хотя это не строгие правила, а только рекомендации, их стоит придерживаться. Это связано с тем, что образец должен быть как можно чище с реальной концентрацией вируса в биоматериале – от этого в определенной мере зависит достоверность результата.

Профессиональные риски медицинской сестры: повышаем объективность

Зачастую в организации нет такого объёма данных по профессиональныv рискам (для этого подобное мероприятие должно проводиться регулярно на протяжении нескольких лет), чтобы оценка была максимально объективной.

Видео по теме:

Узнайте, как правильно проводить оценку профессиональных рисков

Такой поведенческий аудит представляет собой наблюдение за работой сотрудника, чье рабочее место подвергается оценке профессиональных рисков, а также беседу с самим сотрудником. Смысл такого аудита – добавить в оценку профессиональных рисков оценку деятельности работника с точки зрения безопасности и скорректировать результаты оценки профрисков на величину человеческого фактора.

К примеру, работнику выдаются средства индивидуальной защиты, но во время ПАБТ выясняется, что он неправильно их применяет (или не применяет их вовсе).Такие данные неизбежно влияют на результаты оценки профессиональных рисков в отрицательную сторону. Вместе с тем, эта информация сразу же становится отправной точкой для действий ответственного или специалиста по охране труда, а также основой для составления плана мероприятий для снижения уровней профессионального риска.

Осмотрите рабочее место и положение работника: остановил ли он работу, увидев Вас, смутился и начал поправлять одежду, инструменты? Спросите, как давно он перечитывал инструкцию по охране труда (не будет лишним проверить вопросом, насколько хорошо работник её знает).

Все эти мелочи способны повлиять на то, на каком уровне окажутся профессиональные риски, в частности – профессиональные риски медицинской сестры.

Этапы ПЦР-анализа

ПЦР-анализ состоит из следующих этапов.
1. Выделение нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК, далее — НК). На данном этапе растительную ткань гомогенизируют и выделяют тотальную НК (как определяемых патогенов, так и растения-хозяина), очищая ее от других соединений, в том числе являющихся ингибиторами ПЦР. Выделение РНК следует проводить только из свежих тканей. Этап занимает около 1-2 часов (время зависит от количества образцов).

1′ (Только для РНК содержащих вирусов). Проведение реакции обратной транскрипции. Так как вирусы растений в большей части являются РНК-содержащими, необходимо провести реакцию обратной транскрипции для наработки на матрице РНК комплементарной ДНК (кДНК). Для проведения реакции обратной транскрипции можно использовать набор производства ООО «АгроДиагностика». Время проведения этого этапа около 1 часа. Для проверки качества выделения РНК ООО «АгроДиагностика» предлагает использовать тест-систему на мРНК гена актина картофеля. Для постановки реакции обратной транскрипции можно использовать другой набор производства ООО «АгроДиагностика» — Комплект реагентов для проведения обратной транскрипции.

2. Постановка ПЦР и анализ результатов. В ходе этого этапа происходит амплификация специфического участка генома патогена (и/или внутреннего контроля). Гомогенные продукты, накопленные в ходе амплификации, можно детектировать различными способами.

При использовании тест-систем на основе ПЦР «в реальном времени» на этом этапе анализ заканчивается. Длительность всего этапа около 2 часов.

При использовании тест-систем в формате FLASH необходимо перенести пробирки в детектор «Джин» и провести детекцию. Длительность этого этапа не более 10 минут.

В случае использования тест-систем с детекций результатов методом электрофореза необходимо провести электрофоерез в агарозном геле в присутствии бромистого этидия. Визуализацию результатов проводят под УФ транслюминатором на длине волны 312 нм. Длительность этапа около 1 часа.

С более подробной информацией о методе ПЦР, его модификациях, особенностях и др. можно ознакомиться на целом ряде сайтов в интернете, в том числе на сайте https://ru.wikipedia.org/wiki/

Все компоненты, необходимые для ПЦР-диагностики конкретного патогена, присутствуют в соответствующих наборах. Необходимо добавить выделенную из образца тотальную ДНК или, в случае диагностики РНК-содержащих вирусов, кДНК синтезированную на выделенной из анализируемого образца тотальной РНК. Все подробности проведения ПЦР и анализа результатов имеются в прилагаемых к наборам инструкциях.

Материал для исследования и правила его забора

Для лабораторного ПЦР-исследования используют различный биоматериал в зависимости от предполагаемого заболевания. Подробнее о материалах и правилах забора, смотрите таблицу ниже.

Материал Правила забора Объем материала
Эпителиальный соскоб или мазок При использовании специального ёршика. Попадание крови недопустимо.

Возможно брать с поверхностей:

  • уретры;
  • конъюнктивы;
  • слизистых дыхательных путей;
  • цервикального канала
Моча Собирать только проснувшись в стерильно чистую ёмкость 50 мл
Мокрота В стерильную баночку Примерно 20 мг
Кровь и её компоненты Берётся из вены, пациент должен прийти натощак Около 1,5 мл
Биологические жидкости Материал берётся стерильным инструментом.

Могут быть исследованы:

  • слюна;
  • околоплодные воды;
  • спинномозговая и суставная жидкости;
  • сок простаты
Примерно 1,5 мл
Биоптата (материал, получаемый при биопсии) Обычно берут из желудка, двенадцатипёрстной кишки До 3 мг

Какие инфекции входят в ПЦР-12

ИППП развиваются в результате воздействия условно патогенной и патогенной микрофлоры на органы мочеполового тракта. При помощи метода ПЦР возможно обнаружить заболевания, протекающие как в острой, так и в хронической форме, а также задолго до того, как появятся первые симптомы болезни. Пациентов часто интересует вопрос о том, какие инфекции входят в ПЦР-12? Перечислим эти заболевания:

  1. Гарднереллез.
  2. Хламидиоз (вызванный видом хламидия трахоматис).
  3. Микоплазмоз (вызванный микоплазмами хоминис или гениталиум).
  4. Гонорея.
  5. Кандидоз (вызванный в первую очередь грибами кандида альбиканс).
  6. Уреаплазмоз.
  7. Герпес 1 и 2 типа.
  8. Трихомониаз.
  9. Вирус папилломы человека (в том числе анализ ВПЧ 16 типа и 18).
  10. Цитомегаловирус.
  11. Анализ на гепатиты разных групп.
  12. ВИЧ-инфекция.

Анализ на ВИЧ с помощью ПЦР позволяет обнаружить инфицирование на сроках 3-4 недель.

Комплексное обследование ПЦР

Комплексный анализ ПЦР: что это такое? Это обследование методом полимезарной цепной реакции, которое включает в себя определение одновременно нескольких видов инфекций: микоплазмы гениталиум, микоплазмы хоминис, гарднереллы вагиналис, кандиды, трихомонады, цитомегаловируса, уреаплазмы уреалитикум, герпеса 1-го и 2-го типов, гонореи, папилломавируса. Цена такой диагностики колеблется от 2000 до 3500 руб. в зависимости от клиники, используемых материалов и оборудования, а также от вида анализа: качественного или количественного. Какой необходим в вашем случае – решит врач. В одних случаях достаточно лишь просто определить наличие возбудителя, в других, например при ВИЧ-инфекции, важную роль играет количественный титр. При диагностике всех вышеперечисленных возбудителей обследование называют «анализ ПЦР-12».

Профессиональные риски медицинской сестры: анализ и оценка

После того, как Вы адаптировали список опасностей, приведённый выше, под специфику должностных обязанностей Вашей медицинской сестры, можно переходить к следующему этапу.

Однако прежде чем начинать оценивать профессиональные риски медицинской сестры, окиньте взглядом ещё раз рабочее место (рабочие зоны) работника. Свежий взгляд поможет обнаружить те опасности, которые не входят в перечень и не могут быть унифицированы. К примеру, дверной проём в отделение слишком низкий, велика вероятность ушиба. Убедившись, что Вы учли все возможные опасности, приступайте к оценке.

Согласно процедуре СУОТ «Управление профессиональными рисками», далее перед Вами встает задача выбора метода оценки профессиональных рисков медицинской сестры. Если ранее на предприятии такого мероприятия по охране труда не проводилось, мы рекомендуем применить метод экспертных оценок.

Особенности сдачи анализа

Биоматериалом для проведения ПЦР-12 зачастую является соскоб из уретры, соскоб из цервикального канала, соскоб из влагалища либо смешанный соскоб.

Проведенная в современных диагностических центрах процедура анализа не должна причинять пациенту значительных болезненных ощущений. При проведении забора биологического материала используется анестезирующий крем, который снижает чувствительность и позволяет провести анализ без причинения дискомфорта.

Врачу необходимо тщательно соблюдать методику забора. Для избежания ложноотрицательных результатов важна стерильность пробы, отсутствие крови и исключение попадания возбудителей с других участков тела.

Преимущества ПЦР

  1. 100% точность диагностики – если в крови есть даже несколько фрагментов ДНК возбудителя, с помощью ПЦР они буду выявлены, и будет поставлен точный диагноз. Это главное отличие данного метода от других способов диагностики – ИФА, общего анализа крови и прочих.
  2. Специфичность. При проведении ПЦР отсутствует такое понятие, как ложноположительный или ложноотрицательный результат. В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА).
  3. Возможность проведения анализа сразу на несколько возбудителей из одного образца биоматериала, что делает метод удобным для пациента – не нужно несколько раз сдавать анализ.
  4. Быстрота. Не нужно выделять и выращивать возбудителя на питательных средах, как это делается при бактериологическом исследовании. Результат может быть готов уже в день сдачи анализа.
  5. С помощью ПЦР выявляют возбудителей латентных заболеваний, когда возбудитель в организме есть, но он еще не вызвал заболевание, или когда пациент является носителем инфекции (гепатита или ВИЧ).
  6. Низкая стоимость. Цена анализа ПЦР на одного возбудителя составляет 250-500 рублей. Чуть дороже стоит полуколичественный анализ на вирусы – около 1000 рублей.
Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock
detector